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    九游官方端入口和数明小(xiǎo)讲堂 | 新冠核酸检测之PCR技术

    2022-04-07

    九游官方端入口和数明(míng)小讲堂 | 新冠核酸检测之PCR技术

     

    疫情防控

    科学防疫(yì) 九游官方端入口和数明有

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    当前上海正(zhèng)处于抗新型冠状病(bìng)毒肺炎疫情防控的关(guān)键(jiàn)阶段,在这(zhè)个没有硝烟的(de)战场上,及时快速地(dì)筛(shāi)查新冠感染者并及(jí)时进行隔离是阻止新冠病毒肆意蔓延的最有效且唯一的手段。核酸检测是目前筛查新冠感染者最精准、有效、低成本(běn)的技(jì)术(shù)方式。

     

    什么是PCR

    聚合酶链(liàn)式(shì)反(fǎn)应(Polymerase Chain Reaction), 简称PCR, 又称多聚酶链式反应,是(shì)一项利用DNA双链复制(zhì)的原理,在生物体外(wài)复制特定DNA片段的核酸合成技术(shù)。透过这项技术,可(kě)在短时间内大量扩(kuò)增目的(de)基(jī)因,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物(wù)体。

     

    PCR扩增的三个基本步骤(zhòu)

    1变性:模板(bǎn)DNA经加(jiā)热至(zhì)94℃左右(yòu)并保(bǎo)持一定时间后,基于DNA半保(bǎo)留复(fù)制原(yuán)理,还(hái)有碱基互补配对(duì)原则,即复制的过程中双链(liàn)DNA会(huì)解链,由双链(liàn)变成单链,为下轮反应(yīng)做准(zhǔn)备;

    2退火(huǒ):模板DNA经加热变性(xìng)成单链(liàn)后,温度降至55℃左右,引物(wù)与模板DNA单(dān)链(liàn)的互补序列配对结合(hé);

    3延(yán)伸:温度再升至72℃左(zuǒ)右,在DNA聚合酶的作用下,把游(yóu)离的dNTP按照碱(jiǎn)基互补配(pèi)对原则结合到单链(liàn)上,形成一条由旧链和(hé)新链杂合成的(de)新的双链(liàn)DNA

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    PCR扩增(zēng)原理:变形-退火-延伸(shēn)温(wēn)度循环

     

    理论上,经(jīng)过上面步骤,目标DNA浓度(dù)可增(zēng)加一倍。重复循环上(shàng)述过程(chéng),可(kě)获得更多的(de)半保留(liú)复(fù)制链,而形成的新链(liàn)又可成为下次(cì)循环的模板。每(měi)完(wán)成(chéng)一个循(xún)环需24分钟(zhōng), 仅(jǐn)需(xū)23小时就能将目标(biāo)DNA扩增放大几百(bǎi)万倍(bèi)。

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    全自动核(hé)酸提纯及实(shí)时荧光(guāng)PCR分析系(xì)统(tǒng)

     

    经过以上分析,我们就可以(yǐ)理解(jiě)为(wéi)什么核(hé)酸(suān)检测结果最快能(néng)在几个(gè)小(xiǎo)时内出结果。

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    实时荧光PCR定量分析       

    PCR扩增仪温度控制指标主要有:温度(dù)的准确性、均匀性、以及升降温速度。

    1. 温度的准(zhǔn)确(què)性:是(shì)指样品孔温度与设定温(wēn)度(dù)的一致性,它直接关系到实验(yàn)的成(chéng)败。因(yīn)而对PCR扩增仪而言温度控制就(jiù)意(yì)味着产品质量(liàng)。

    2. 温度的均匀性(xìng):是指样品孔间(jiān)的温度差异,它关系到在不同样品孔(kǒng)进行反应结果的(de)一(yī)致(zhì)性。

    3. 升降温速度:更快的升降温速度,可以有效缩短反应(yīng)时间和可能(néng)的非特(tè)异性结合、反(fǎn)应的时间,从而(ér)提高PCR反应特异性(xìng)。

     

    相较(jiào)于传统的相对稳(wěn)定耐用(yòng)的机械式,新的半(bàn)导体温控(kòng)技术——TEC温度控制技术具有升降(jiàng)温更快(kuài)速的优(yōu)势,已经成为PCR扩增仪(yí)的首选温度控制技术。

     

    半导(dǎo)体(tǐ)制冷器(qì) (Thermo Electric Cooler,简称 TEC) 是利用半导体材料的帕尔贴效(xiào)应制成的(de)。如图下所(suǒ)示,帕尔帖(tiē)效应是指当直流电流通过两种(zhǒng)半导体材料组(zǔ)成的(de)电偶时,其一端(duān)吸热(rè),一端放热(rè)的现象。TEC 包括一些 P 型和 N 型(xíng)对(组(zǔ)),它们通过电极连在一起,并且夹在(zài)两个陶瓷(cí)电极之间(jiān),当有电流(liú)从 TEC 流过(guò)时,电流产生的热量会从 TEC 的 一(yī)侧传到另一侧,在 TEC 上产生(shēng)侧和(hé)侧,这就是 TEC 的加热与致冷原理 

     

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    帕尔帖效应,PN 节(jiē)以及热(rè)流动示意图

     

    PCR扩增仪一般具有(yǒu)两(liǎng)种温控模(mó)式,即模块温控模式(Block-control)和反应(yīng)管温(wēn)控模式(tube-control)。管内样(yàng)品的温(wēn)度无法与温控模(mó)块同(tóng)时达到预设温度,特别是PCR反应中的孵育过程一般为30秒(miǎo)或更短,如果采用只(zhī)有模块温(wēn)控模式(shì)的话,反应混合物孵(fū)育(yù)的时间(jiān)与程(chéng)序设定的时(shí)间(jiān)会有相当大的差距。为了达到反应管内部温(wēn)度(dù)精确控(kòng)制,需采用反(fǎn)应管控(kòng)制模模式,通过温度控制算法进行参数标(biāo)定(dìng)和补偿(cháng),确保反(fǎn)应混合物按(àn)照程序(xù)设定的(de)时间维(wéi)持预设温度。

     

    科技战(zhàn),九游官方端入口和数明在行动

    面对(duì)近期香(xiāng)港、深圳、上海等地奥密克戎的快速(sù)扩散,核酸检(jiǎn)测能力在数量和速度方面都面临着(zhe)极大的考验。九游官方端入口和数明半(bàn)导体积极发挥了科技技术方面的优(yōu)势,组织技术专家研究PCR扩增技术的优化解(jiě)决方案(àn),以功率器件门极(jí)驱动芯片和TEC控制器为(wéi)着力点,优先保障芯片(piàn)供(gòng)应(yīng)和交付,与客户一(yī)起助力抗疫,共(gòng)克时(shí)艰。

     

    九游官方端入口和数明半导体自研的20V-600V耐压全(quán)系列的低边、半桥、三相(xiàng)半桥等(děng)功率管门极驱动(dòng)芯片(SLM2103SSLM2136等)可(kě)用于驱动TEC,协助PCR扩增仪器客户快速、方便地(dì)完成(chéng)系统设(shè)计,在(zài)当前半导(dǎo)体供应短缺时期,可以满足客户设(shè)计方案的快速变更、验证与量产。

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    600V耐压(yā)半桥功率(lǜ)器件(jiàn)驱动芯片工作示意(yì)图

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    600V耐压三相半桥功率器件驱动芯(xīn)片(piàn)工作示(shì)意图(tú)

     

    九游官方端入口和数明(míng)半导体(tǐ)的单(dān)芯片TEC控(kòng)制(zhì)器产(chǎn)品——SLM8833/8834/8835 集成了TEC驱动电路、低温飘高精度温度误差放大(dà)器及环路补偿电路、温度设(shè)定与传感电路,采用高(gāo)效的单电感架构,实现(xiàn)更紧凑、更高的转换效率及更低的噪(zào)声;其中功率(lǜ)级集(jí)成(chéng)了超低阻抗的MOSFET,损耗更(gèng)低寿命更久(jiǔ);同时匹(pǐ)配模拟PID与数字PID两种温控(kòng)模式,以满(mǎn)足客户PCR扩(kuò)增仪(yí)的小型化创新设计需求

     

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    SLM8834 构成的 TEC 系(xì)统框图

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    模拟PID温控器模式 

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    数字PID温控模(mó)式(shì)

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